Краснуха диагностический титр

Содержание:

Краснуха при беременности

Краснуху принято считать легким заболеванием. Однако такое определение справедливо для течения этой инфекции у детей.

Заболевание же краснухой беременных чревато серьезными последствиями для будущего ребенка.

Краснуха вызывается вирусом, который передается воздушно-капельным путем. Источником вируса чаще бывают дети, поэтому вероятность подхватить краснуху беременной, у которой уже есть один ребенок, повышается. Особенно, если ребенок ходит в детский сад, спортивную секцию или школу.

Что происходит?

При инфицировании женщины на первой неделе беременности поражение плода возникает в 80% случаев, на 2-4-й неделе — в 60%, на 5-8-й неделе — в 30% и на 9-12-й неделе — в 10%. При инфицировании на более поздних сроках вероятность развития врожденных пороков снижается, однако даже на 5 месяце еще существует такая опасность для 1 из 10 детей.

Опасность вируса краснухи в том, что он практически всегда передается от матери плоду и повреждает его. Врожденная краснуха может повредить любой орган ребенка, однако чаще всего встречается триада — катаракта, глухота и порок сердца. Возможны также последствия в виде нарушений со стороны крови (гемолитическая анемия, тромбоцитопения), воспаления легких, низкой массы тела и маленького роста при рождении.

Неблагоприятное влияние краснухи на плод проявляется также спонтанными абортами (30%), мертворождением (20%), смертью в периоде новорожденности (20%). Частота мертворождений составляет около 10% при заболевании женщины в первом триместре, 5% — при заболевании во втором и 2% — в третьем триместре. Врожденная краснуха является причиной смерти в 20% случаев от числа всех умерших от внутриутробных инфекций, она также нередко приводит к необходимости выбора между абортом и сохранением инфекции при заражении матери во время беременности.

Как распознать?

Та женщина, которая переболела краснухой в детстве или сделала прививку от краснухи, может не волноваться, что ее ребенок заразится, потому что у нее есть иммунитет. Если беременная женщина не знает, болела она краснухой или нет, а прививку не делала, то ей необходимо сдать анализ крови на антитела к краснухе.

Наличие антител класса Ig G свидетельствует о ранее перенесенном инфицировании вирусом краснухи. Высота титра антител к вирусу краснухи класса IgG значения не имеет, главное, что они есть. Это означает, что иммунитет к краснухе в организме присутствует, и плод будет защищен от возможного заражения вирусом краснухи во время беременности. Исключение составляет титр антител IgG ниже указанного в бланке референтного значения (показатель нормы), что означает отсутствие иммунитета к краснухе. В этом случае прививка от краснухиперед планируемой беременностью – обязательное мероприятие. Прививочный иммунитет вырабатывается через ослабленную, но все-таки первичную инфекцию, поэтому в течение 3 мес после прививки необходимо предохраняться (до исчезновения IgM).

Референтные значения для титра антител класса IgM также должны быть указаны на бланке лаборатории, в которой выполняется исследование. Титр антител класса IgM ниже порогового значения (негативный) в сочетании с низким титром антител IgG означает отсутствие иммунитета к краснухе. В этом случае необходимо провести вакцинацию от краснухи перед планируемой беременностью. Если титр антител класса IgM выше допустимых значений – это говорит о том, что заболевание находится в ранней (острой) стадии, и необходимо выяснить в каком триместре беременности произошло заражение. Это самый опасный для беременности вариант, так как в этом случае вирус может проникать через плаценту и повредить здоровью ребенка.

Способ определения титров антител методом иммуноферментного анализа при диагностике вирусных инфекций

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической вирусологии, и может быть использовано для более точной оценки результата ИФА при выявлении антител к вирусам, а также для контроля эффективности лечения. Сущность способа состоит в том, что для более точной оценки результата ИФА при выявлении антител к возбудителям вирусных инфекций соответствующие иммуноглобулины, меченные пероксидазой, добавляют только в разведения сыворотки 1: 200 и 1:3200 и далее из сывороток крови больных с высокими значениями титров готовят разведения сыворотки таким образом, чтобы значения показателя оптической плотности (ОП) находились в пределах прямопропорциональной зависимости от концентрации иммуноглобулинов и за титр антител принимают наименьшее разведение сыворотки, после которого ОП остается на одном уровне. Техническим результатом является повышение точности способа оценки результата ИФА. 7 табл., 2 ил.

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической вирусологии, и может найти применение для более точной оценки результата ИФА при выявлении антител к вирусам, а также для контроля эффективности лечения.

В настоящее время определение титров антител методом ИФА является одним из скрининговых тестов для диагностики многих вирусных инфекций.

В литературе приводятся многочисленные данные по оценке гуморального иммунитета с помощью ИФА и конкретные цифры значений титров антител: от 1: 20000 до 1:102400 («Организацию и проведение мероприятий против Крымской геморрагической лихорадки на территории природных очагов России», методические рекомендации, г. Москва, 2001 г.; авт. свидетельство «Способ диагностики степени тяжести вирусного гепатита В» 4662993/14 от 16.03.89 г.). Однако исследователи, занимающиеся этим вопросом, сталкиваются с рядом трудностей: невозможностью точного установления титра, несовпадением его величины с клиническими симптомами болезни, целесообразностью назначения противовирусного лечения на основании величины показателя титров специфических антител. Значение количественного показателя титра антител играет существенную роль при клинической оценке активности вирусной инфекции, определении тактики ведения пациента, а также при назначении лечения и проведении контроля его эффективности.

Особенно наглядно эти проблемы можно показать на примере инфекций, вызванных цитомегаловирусом (ЦМВ) и вирусом простого герпеса (ВПГ). Диагностика цитомегаловирусной и герпетической инфекций остается до настоящего момента актуальной, подтверждением чего является большое количество методов и тест-систем для их выявления.

Поскольку ЦМВ и ВПГ являются персистирующими в организме человека возбудителями, то у иммунокомпетентных лиц после первичного инфицирования вырабатываются антитела, которые сохраняются в невысоких титрах (от 1:50 до 1: 800) в течение всей жизни и не имеют диагностического значения.

При выявлении у пациента антител в титре более 1:800 необходимо установить причину повышенного значения показателя, особенно при отсутствии клинической симптоматики. Как правило, в этих случаях назначают повторный анализ через определенный срок (2-3 недели), после чего на основании полученных результатов с учетом данных анализа и клинических симптомов ставят окончательный диагноз. Совершенно очевидно, что от качественной точной оценки показателя титра антител зависит тактика назначения лечения специфическими препаратами, которые являются дорогостоящими и обладающими рядом серьезных побочных действий на организм (Руководство по лабораторной диагностике цитомегаловирусной инфекции для врачей. М., 1996).

Основным тестом определения антител является в настоящее время метод ИФА. Однако большинство выпускаемых различными предприятиями тест-систем для ИФА не позволяют дать количественную оценку содержащихся в сыворотке крови человека специфических антител, проследить динамику их роста или снижения в процессе лечения, т.к. предназначены только для определения иммунного статуса: тест-система иммуноферментная для выявления антител к вирусу герпеса простого 1 и 2 типов «Герпес-скрин», ЗАО «Биосервис», г. Москва; тест-система иммуноферментная для выявления антител к цитомегаловирусу «ЦМВ-скрин», ЗАО «Биосервис», г. Москва и другие.

Наиболее близкими аналогами являются: «Инструкция по применению иммуноферментной тест-системы для определения Ig класса G к цитомегаловирусу ЦМВ-IgG» (ЗАО «ИмДи», Кольцово Новосибирской области), «Инструкция к тест-системе Beктo-BПГ-IgG-стрип» (ЗАО «Вектор-Бест», Кольцово Новосибирской области), «Инструкция к тест-системе Цитомега Стрип G» (ЗАО «НИАРМЕДИК ПЛЮС», г. Москва), «Инструкция по применению тест-системы иммуноферментной для выявления антител к вирусу краснухи Краснуха-скрин» (ЗАО «Биосервис», г. Москва), которые предполагают при определении титра антител двукратное разведение сыворотки.

Известно, что титр антител — это максимальное разведение сыворотки, содержащее специфические антитела. При определении иммунного статуса делают одно разведение сыворотки, соответственно прилагаемой к тест-системе инструкции (1: 50, 1: 100) и затем при необходимости рекомендуют ее дальнейшее титрование путем последовательных двукратных разведений. Нами установлено, что при наличии в сыворотке крови антител в титре до величины обратной 1: 600-1:800 существует прямопропорциональная зависимость между значением оптической плотности и показателем титра антител исследуемой сыворотки (фиг.1). Выше этой обратной величины титра прямопропорциональная зависимость нарушается и при дальнейшем двукратном шаге титрования (1:1600, 1:3200, 1:6400 и т. д.) получают ошибку, которая тем больше, чем больше разведение. Это показано прямым титрованием сыворотки, при котором каждое разведение сыворотки делают из цельной сыворотки, при этом установлено, что чем меньше шаг при типировании, тем меньше ошибка.

Такие данные соответствуют основному закону колориметрии Бугера-Ламберта-Бера. В реальных условиях аналитических определений окрашенные вещества при разбавлении или при действии посторонних веществ разрушаются с образованием бесцветных (или иначе окрашенных) продуктов взаимодействия. Вследствие этого наблюдается нарушение прямопропорциональной зависимости между концентрацией и оптической плотностью. Эти нарушения называют положительными или отрицательными отклонениями от закона Бугера-Ламберта-Бера.

Целью настоящего изобретения является повышение точности способа оценки результата ИФА при определении титра антител в сыворотках крови больных при диагностике вирусных инфекций.

Поставленная цель достигается тем, что сыворотку крови, взятой из локтевой вены, в количестве 3-5 мл, получают путем центрифугирования при 2500 об/мин в течение 10-15 мин, инактивируют при 56 o С 30 мин, предварительно готовят из нее ряд последовательных двукратных разведений, добавляют иммунопероксидазные коньюгаты и учитывают результаты реакции на АКИ-Ц-01 при длине волны 492 нм, а затем для более точной оценки результата ИФА при выявлении антител к возбудителям вирусных инфекций соответствующие иммуноглобулины, меченные пероксидазой, добавляют только в разведения сыворотки 1:200 и 1:3200 и далее из сывороток крови больных с высокими значениями титров готовят разведения сыворотки таким образом, чтобы значения показателя ОП находились в пределах прямопропорциональной зависимости от концентрации иммуноглобулинов: если величина ОП сыворотки, полученная при обычном двукратном титровании в разведении 1:200 выше 1,6-2,0 по шкале прибора, а в разведении 1: 3200 — меньше 1,0, то сыворотку 1:200 разводят в 2,5 раза и в дальнейшем титруют с интервалом 1:500, а если величина ОП сыворотки в разведении 1:3200 больше 1,0 по шкале прибора, то сыворотку 1:200 разводят в 5 или 10 раз и готовят последующие разведения с интервалом 1:1000 или 1:2000, и за титр антител принимают наименьшее разведение сыворотки, после которого ОП остается на одном уровне (ОП пробы — ОП контроля не менее 0,21).

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1. Больная П. наблюдалась в женской консультации по поводу отягощенного акушерского анамнеза.

При исследовании сыворотки больной в ИФА тест-система производства ЗАО «ИмДи», Кольцово, Новосибирской обл. с титрованием сыворотки путем последовательных двукратных разведений титр антител (IgG) к ЦМВ составил 1:25600.

При прямом разведении сыворотки 1:1000 из 1:200 и далее с шагом 1:2000 титр антител (IgG) в сыворотке составил 1:5000 (см. табл. 1).

Диагноз был подтвержден путем обнаружения антигенов ЦМВ методом флюоресцирующих антител.

Пример 2. Больной К. обратился с жалобами на высыпания в области половых органов.

При обследовании сыворотки крови больного в ИФА (тест-система производства «Биосервис», г. Москва), приготовленной путем последовательных двукратных разведений на наличие антител (IgG) к ВПГ у него были обнаружены антитела в титрах: 1:6400 к ВПГ I типа и 1:3200 к ВПГ II типа (см. табл. 2).

Другие публикации:  Как правильно лечить ангину у ребёнка

Методом прямого титрования сыворотки шагом 1:500 (с разведения 1:1000) титр антител составил к ВПГ I типа — 1:2000 и 1:1500 к ВПГ II типа (см. табл. 3).

Диагноз был подтвержден путем обнаружения антигенов ВПГ методом флюоресцирующих антител.

Пример 3. Женщина во второй половине беременности обратилась к врачу по поводу контакта с ребенком, которому был поставлен диагноз краснушной инфекции. Беременная не знала, болела ли она краснухой в детстве — при серологическом исследовании в ИФА у нее были обнаружены антитела (IgG) к вирусу краснухи в титре 1:1600 при двукратном разведении сыворотки.

Через две недели был проведен повторный забор крови и исследованы парные сыворотки при аналогичном способе титрования. Титр антител остался прежним (см. табл. 4).

При анализе парных сывороток с шагом разведения 1:500 (из исходных 1: 200) титр антител составил 1:1000 (см. табл. 5).

Пример 4. Больной Е. обратился в глазное отделение с жалобами со стороны органов зрения и ему был поставлен диагноз вирусное заболевание глаз.

При исследовании в ИФА (тест-система производства ЗАО «НИАРМЕДИК ПЛЮС», г. Москва) сыворотки больного, приготовленные путем последовательных двукратных разведений, были выявлены иммуноглобулины класса G к ЦМВ в титре 1:3200 (см.фиг.2), (см. табл. 6).

Исследование той же сыворотки титрованием с шагом 1:200, начиная с разведения 1:1000 показало, что в сыворотке больного Е, титр антител к ЦМВ составил 1:1200. (см. табл. 7).

Диагноз был подтвержден путем обнаружения антигенов ЦМВ методом иммунофлюоресцентного анализа.

Таким образом, предлагаемый способ определения титров антител методом ИФА позволяет более точно оценивать величины титров антител в пределах прямопропорциональной зависимости ОП от их концентрации в сыворотке крови, контролировать их изменения как в ходе заболевания, так и в процессе лечения. Данный способ может быть рекомендован для определения титров специфических антител и при других инфекциях.

Способ определения титров антител методом иммуноферментного анализа при диагностике вирусных инфекций путем приготовления ряда последовательных двукратных разведений сыворотки, добавления иммуно-пероксидазных конъюгатов и учетом результатов реакции на АКИ-Ц-01 при длине волны 492 нм, отличающийся тем, что для более точной оценки результата ИФА при выявлении антител к возбудителям вирусных инфекций соответствующие иммуноглобулины, меченные пероксидазой, добавляют только в разведения сыворотки 1: 200 и 1: 3200 и далее из сывороток крови больных с высокими значениями титров готовят разведения сыворотки таким образом, чтобы значения показателя оптической плотности (ОП) находились в пределах прямопропорциональной зависимости от концентрации иммуноглобулинов: если величина ОП сыворотки в разведении 1: 200 выше 1,6-2,0 по шкале прибора, а в разведении 1: 3200 — меньше 1,0, то сыворотку 1: 200 разводят в 2,5 раза и в дальнейшем титруют с интервалом 1: 500, а если величина ОП сыворотки в разведении 1: 3200 больше 1,0 по шкале прибора, то сыворотку 1: 200 разводят в 5 или 10 раз и готовят последующие разведения с интервалом 1: 1000 или 1: 2000 и за титр антител принимают наименьшее разведение сыворотки, после которого ОП остается на одном уровне (ОП пробы — ОП контроля не менее 0,21).

Напряженность противокраснушного иммунитета у студенток Текст научной статьи по специальности «Медицина и здравоохранение»

Аннотация научной статьи по медицине и здравоохранению, автор научной работы — Рогушина Наталья Леонидовна, Самодова О. В., Титова Л. В.

Высокие показатели заболеваемости краснухой , вовлечение в эпидемический процесс лиц старшего возраста, отсутствие четких сведений о распространенности синдрома врожденной краснухи все это определяет актуальность изучения краснушной инфекции и оценки специфического иммунитета у молодых женщин. Проведено исследование специфических иммуноглобулинов класса G к вирусу краснухи методом иммуно-ферментного анализа у 332 студенток медицинского университета. Результаты обследования показали, что 92,5 % женщин невосприимчивы к краснушной инфекции, большинство из них формируют высокий уровень защиты. Напряженность специфического гуморального иммунитета у вакцинированных выше по сравнению с перенесшими крас-нушную инфекцию.

Похожие темы научных работ по медицине и здравоохранению , автор научной работы — Рогушина Наталья Леонидовна, Самодова О. В., Титова Л. В.,

HAND PURULENT DISEASES IN RESIDENTS OF RURAL LOCALITY WITH UNDEVELOPED INFRASTRUCTURE RUBELLA IMMUNITY STRESS IN FEMALE STUDENTS

High indices of rubella morbidity rate, involving of older persons into the epidemic process, absence of clear data on prevalence of the syndrome of congenital rubella determine urgency of studying rubella infection and assessment of specific immunity in young women. A study of specific immunoglobulins G to rubella virus by the method of an immunofermental analysis in 332 female students of the Medical University has been conducted. The examination results showed that 92,5 % of the women were resistant to rubella infection, most of them formed a high defense level. Specific humoral immunity stress in immunized persons was higher in comparison with those who had rubella infection.

Текст научной работы на тему «Напряженность противокраснушного иммунитета у студенток»

НАПРЯЖЕННОСТЬ ПРОТИВОКРАСНУШНОГО ИММУНИТЕТА У СТУДЕНТОК

© 2010 г. Н. Л. Рогушина, О. В. Самодова, Л. В. Титова

Северный государственный медицинский университет, г. Архангельск

Высокие показатели заболеваемости краснухой, вовлечение в эпидемический процесс лиц старшего возраста, отсутствие четких сведений о распространенности синдрома врожденной краснухи — все это определяет актуальность изучения краснушной инфекции и оценки специфического иммунитета у молодых женщин. Проведено исследование специфических иммуноглобулинов класса G к вирусу краснухи методом иммуно-ферментного анализа у 332 студенток медицинского университета. Результаты обследования показали, что 92,5 % женщин невосприимчивы к краснушной инфекции, большинство из них формируют высокий уровень защиты. Напряженность специфического гуморального иммунитета у вакцинированных выше по сравнению с перенесшими крас-нушную инфекцию.

Ключевые слова: краснуха, иммунитет, вакцинация, студентки, Архангельская область.

Краснуха представляет собой заболевание, протекающее в форме врожденной и приобретенной инфекции. Типичная приобретенная краснуха протекает легко и характеризуется наличием мелкой пятнисто-папулезной сыпи, незначительным повышением температуры, отсутствием интоксикации и увеличением заднешейных и заушных лимфатических узлов [11]. Трудности диагностики заключаются в том, что заболевание может протекать не только в манифестной, но и в инаппарантной формах [8]. Бессимптомное течение значительно затрудняет выявление инфекции, которая представляет непосредственную опасность для восприимчивых беременных женщин. По данным Всемирной организации здравоохранения, до 90 % детей, чьи матери были инфицированы вирусом краснухи в течение первого триместра беременности, могут иметь врожденные пороки развития [5, 8, 13, 18—22]. Наиболее серьезными последствиями внутриутробно перенесенной инфекции являются пороки сердца, глухота, слепота, умственная отсталость. Длительное и сложное лечение больных, необходимая медицинская и социальная помощь детям-инвалидам требуют значительных финансовых затрат. В России экономический ущерб от этого заболевания измеряется десятками миллионов рублей на один случай врожденной краснухи [7].

Именно синдром врожденной краснухи (СВК) определяет социальную и экономическую значимость этой инфекции. ВОЗ и ЮНИСЕФ разработали стратегическую программу предупреждения врожденной краснухи в европейском регионе. К 2010 году поставлена задача снизить уровень заболеваемости до показателя менее одного случая на 100 тыс. живорожденных [11, 18].

Профилактика СВК во многом зависит от социальной мобилизации населения, прежде всего девушек и женщин детородного возраста, а также медицинских работников. Решение проблемы предупреждения СВК возможно только с помощью вакцинопрофилактики в детском возрасте или иммунизации женщин детородного возраста [1, 2, 16]. В развитых странах иммунопрофилактика краснухи проводится с 1969 года [8], тогда как в Российской Федерации вакцинация против краснухи была включена в календарь профилактических прививок в 1997 году, в Архангельской области она проводится с 2000 года [10].

По данным разных авторов [1, 5, 8, 9, 12], изучение эффективности применяемых в РФ вакцин у ранее серонегативных показало их высокую иммуногенность, которая составляет 94,3—100,0 %. Формирование специфического иммунитета после введения вакцины определяется не только качеством используемого препарата, но и особенностями иммунного ответа. Как правило, не отвечают выработкой специфических антител 5—10 % вакцинированных и 5 % ревакцинированных, которые

имеют риск заболевания [17]. Лица, не ответившие сероконверсией на однократную иммунизацию, должны быть повторно привиты, если на повторную иммунизацию не вырабатываются специфические антитела, это может свидетельствовать о толерантности к краснушному антигену, которая наблюдается у лиц, инфицированных внутриутробно [2]. В целом риск развития СВК у детей, родившихся от привитых женщин, составляет не более 5 % в сравнении с 80 % риска у непривитых [2].

Распространение краснухи среди населения и формирование иммунной прослойки достаточно разнообразно и зависит от ряда факторов, прежде всего от восприимчивости и иммунитета в каждой возрастной группе.

Наиболее точную информацию о состоянии противокраснушного иммунитета в популяции дает проведение серомониторинга [9]. Серологический мониторинг предусматривает сбор и оценку сведений, характеризующих состояние популяционного иммунитета путем выборочных серологических обследований различных групп населения. Программа реализации серологического мониторинга предполагает многоцелевое обследование индикаторных групп, общих для ряда управляемых инфекций. Существуют семь таких групп: дети третьего года жизни, 7—8, 14—15 лет, взрослые 24—25, 34—35, 44—45 и 54—60 лет. Для изучения противокраснушного иммунитета рекомендуют использовать 1—4 группы, причем в 3—4 группах целесообразно обследовать только лиц женского пола [4]. По данным различных авторов [4,

8, 13, 15], в РФ доля восприимчивых подростков составляет до 65,0 %, молодых женщин — до 31,2 %, беременных — до 31,7 %, медицинских работников

В Архангельской области А. В. Тулисовым [14] проводилась оценка эффективности вакцинации и напряженности иммунитета к вирусу краснухи у детей 1-3 и 11-16 лет, но не был изучен специфический иммунитет женщин фертильного возраста.

С учетом вышеизложенного целью нашего исследования явилось изучение показателей специфического гуморального иммунитета к краснушной инфекции у студенток младших и старших курсов Северного государственного медицинского университета (г. Архангельск)

Материалы и методы

Методом случайной выборки в исследование были включены 172 студентки I — III курсов (первая группа) и 160 человек IV—VI курсов (вторая группа) разных факультетов Северного государственного медицинского университета в возрасте от 17 до 29 лет. На момент обследования острого заболевания или обострения хронической патологии у женщин не зафиксировано. Исследование проводилось с марта 2006 по февраль 2008 года. Анамнестические данные уточняли методом анонимного анкетирования. Анкета включала следующие вопросы: место жительства

(город или область), возраст женщины, сопутствующие соматические заболевания, перенесенные ранее экзантемные инфекции (корь, скарлатина, ветряная оспа, инфекционный мононуклеоз, иерсиниозная инфекция), наличие краснухи в анамнезе и возраст, в котором она была зарегистрирована, ее лабораторное подтверждение, наличие и срок иммунизации. Тип исследования — поперечное.

Лабораторным подтверждением перенесенной инфекции считали обнаружение в сыворотке крови специфических иммуноглобулинов класса G (IgG) к вирусу краснухи. Специфические антитела определяли непрямым методом твердофазного иммунофермент-ного анализа. Лабораторное исследование проводили тест-системами D-2552 «ВектоРубелла-IgG-стрип» фирмы ЗАО «Вектор-Бест», Россия (ФСП 420117-4696-03). Для количественного определения противокраснушных IgG в сыворотке крови величину оптической плотности пересчитывали в МЕ/мл по специальной формуле. По инструкции, прилагаемой к тест-системе, титр антител к краснухе менее 10 МЕ/мл расценивали как отрицательный, от 11 до 15 МЕ/мл — сомнительный, равный или превышающий 15 МЕ/мл — защитный.

Обработка данных проведена с использованием пакета статистических программ SPSS for Windows версия 17.0. По критерию Шапиро — Уилка выборки были проверены на нормальность. Для нормально распределённых показателей достоверность различий средних значений для двух групп определяли с использованием t-критерия Стьюдента для независимых выборок, при отклонении распределения от нормального — с использованием критерия Манна — Уитни (U). Рассчитывалась величина эффекта критериев Стьюдента и Манна — Уитни (r). Для сравнения трех и более групп применяли дисперсионный анализ, при отклонении распределения от нормального использовали критерий Краскела — Уоллиса. Для выявления связей между показателями были вычислены бивариантные коэффициенты корреляции Пирсона (для нормального распределения) и Спирмена (для прочих). Данные представляли в виде М + m, где M — среднее арифметическое и m — стандартная ошибка среднего арифметического, для признаков, распределение которых отличалось от нормального, использовали медиану (Ме), в качестве мер рассеяния — 25 и 75 процентили. Методы описательной статистики представлены с определением 95 % доверительного интервала (95 % CI). Различия для всех видов анализа считали статистически значимыми при р

Другие публикации:  Человек болен бешенством

Свидетельство о регистрации СМИ Эл № ФС77-52970

Диагностика краснухи: подготовка к анализу, методы исследования и стоимость

Краснуха — одно из самых опасных заболеваний для беременных женщин. В других случаях болезнь обычно протекает относительно легко. Однако для беременных риск очень велик, особенно при заражении в первом триместре — крайне высока вероятность серьезных патологий плода и даже его гибели. Кроме того, для краснухи характерны разнообразные и тяжелые осложнения. Поэтому к диагностике краснухи и проведению вакцинации нужно отнестись со всей возможной ответственностью.

Краснуха: что это за болезнь и в чем особенности ее диагностики

Краснуха — вирусное инфекционное заболевание, которое вызывается вирусом Rubella. Он передается воздушно-капельным путем, а также через плаценту от матери к плоду. Чаще всего краснухой болеют маленькие дети в возрасте 4–7 лет. При попадании в организм вирус поражает клетки крови — эритроциты, он также оказывает влияние и на нервные волокна.

Симптомы краснухи очень похожи на признаки ОРВИ — слабость, покраснение и отек гортани, насморк, конъюнктивит, высокая температура (около 38 °C), увеличение лимфатических узлов. Однако через несколько дней на теле больного появляется нехарактернаядля респираторных заболеваний сыпь — небольшие красные пятнышки, результат разрушения мелких капилляров.

Обычно прогноз благоприятный, хотя в редких случаях развиваются такие осложнения, как артрит, энцефалит и нарушения свертываемости крови.

Но наиболее опасна краснуха для беременных женщин. Особенность заболевания в том, что она оказывает очень серьезное влияние на плод, и чем меньше срок, на котором будущая мама переболела краснухой, тем выше риск патологий у плода. При инфицированиина сроке 3–4 недель патологии выявляются у 60–80% новорожденных. Среди последствий врожденной краснухи — пороки сердца, катаракта, недоразвитость глазных яблок, микроцефалия, глухота и умственная отсталость. Риск гибели плода и новорожденногоребенка в таких случаях очень велик. Чем раньше произошло заражение, тем более тяжелыми будут последствия. Впрочем, иногда они проявляются не сразу — ребенок рождается здоровым, но со временем патологии начинают проявляться.

Риск так велик, что при инфицировании краснухой на самых первых неделях беременности может быть рекомендовано ее искусственное прерывание. Если же будущая мама заразилась во втором или третьем триместре, необходимо УЗИ-исследование плода для контроляза развитием патологий.

Проблема диагностики краснухи состоит в том, что ее нетрудно принять за ОРЗ, энтеровирусную инфекцию, корь или аллергическую реакцию. Кроме того, в некоторых случаях у беременных краснуха протекает почти бессимптомно. Для постановки диагноза необходим анализ на краснуху. Причем желательно пройти несколько исследований.

Когда сдают анализ на краснуху

Анализ на краснуху необходимо сделать при планировании беременности. Если анализ не выявит наличие антител (то есть иммунитета к краснухе), потребуется сделать прививку. И если беременность наступит спустя 2–3 месяца после вакцинации, никаких проблем не будет.

Анализ на краснуху также следует сдать при возникновении симптомов этого заболевания. Как уже было сказано, краснуха очень похожа на многие другие заболевания, и для выбора действенной терапии необходимо точно установить возбудителя болезни.

Его также назначают при увеличении лимфоузлов — иногда этот симптом является единственным проявлением краснухи.

Кроме того, рекомендуется сдать анализ на краснуху, если недавно вы контактировали с носителем инфекции.

Как подготовиться к исследованию

Биоматериалом для проведения анализа на краснуху является кровь. Ее сдают утром натощак (перед сдачей анализа можно пить воду). Как минимум за сутки до исследования следует отказаться от алкоголя, жирной пищи, сауны и других процедур, повышающих температуру тела, а также физических нагрузок. Анализ на краснуху желательно делать через 2 недели после окончания курса медикаментозной терапии — некоторые препараты могут повлиять на результат. Если же это невозможно, следует заранее предупредить врача, что вы принимаете лекарства, не забыв указать их дозировку.

Процедура забора биоматериала и методы исследования

Чаще всего для анализа на краснуху берут кровь из вены, хотя в некоторых случаях — при подозрении на внутриутробное инфицирование — берут кровь из пуповины или исследуют околоплодные воды. На сегодняшний день при диагностике краснухи используются три лабораторных методики:

Серологический метод

Серологический анализ на краснуху позволяет выявить антитела к этому заболеванию в крови у пациента. Однако он не дает информации о типе антител, а это очень важно для определения стадии болезни, так как на разных этапах соотношение антител групп А и G меняется. Серологический метод при диагностике краснухи применяется все реже из-за не особенно высокой точности — всего около 75%. Результаты можно получить через 1–3 дня.

Иммуноферментный анализ (ИФА) считается более точным и чувствительным методом диагностики. Этот способ не просто показывает факт наличия антител, но и позволяет определить их тип и таким образом выяснить, как давно произошло заражение, а также определить этап болезни. Результаты исследования выдают на руки через 1–2 дня.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — один из самых современных и высокочувствительных методов. При помощи ПЦР можно выявить вирус даже на самой ранней стадии заражения, еще до возникновения первых симптомов. При проведении анализа по методу ПЦР фрагмент РНК многократно копируется и затем идентифицируется. Обычно ПЦР назначают для уточнения результата, полученного методом ИФА. Результаты будут готовы на следующий день.

Как прочитать результаты

Результаты анализа на краснуху интерпретирует врач, который учитывает не только результат как таковой, но и множество дополнительных факторов. Мы приводим принципы расшифровки анализов на краснуху только для общей информации, но никак не для самостоятельной постановки диагноза.

Серологический метод

Единицей измерения результата служит индекс авидности IgG антител. 0,6 — позволяет исключить заражение в течение последних 3–4 мес. 0,4–0,6 — сомнительный результат, при котором рекомендовано пройти исследование еще раз через 2 недели.

При диагностике краснухи методом ИФА учитывается наличие антител разных типов. Если в бланке указано IgM-, IgG-, значит, заражения и антител нет, и пациенту требуется вакцинация от краснухи. IgM-, IgG+ указывает на ранее перенесенную инфекцию и наличие иммунитета к этому заболеванию. Результат IgM+, IgG- говорит о наличии краснухи, причем болезнь находится на раннем этапе. IgM+, IgG+ — это острая краснуха.

Результат, обозначенный как «не обнаружено» или «отрицательно», означает, что РНК вируса не обнаружено. То есть пациент либо здоров, либо с момента заражения прошло слишком мало времени — хотя высокая чувствительность метода позволяет выявлять заболевание даже на ранней стадии. «Положительно» или «обнаружено» говорит о наличии РНК вируса, то есть о том, что человек инфицирован.

Сколько стоит исследование

Стоимость анализов в коммерческих лабораториях зависит от двух основных факторов — уровня клиники и скорости выдачи результатов. Разумеется, что цена в комфортных лабораториях, расположенных в самом центре столицы, всегда несколько выше, чем в маленьких лабораториях на окраинах. Впрочем, в сетевых лабораториях этой разницы может и не быть.

Результаты обычно выдают на руки через 1–3 рабочих дня. Но если вам необходимо получить их в день обращения, будьте готовы доплатить за скорость обработки. Такую услугу предоставляют не все лаборатории.

ИФА на краснуху в коммерческих диагностических лабораториях Москвы стоит примерно 550–750 рублей.

ПЦР стоит около 700–900 рублей.

Серологический анализ обойдется в 1200–1500 рублей.

Стоимость забора материала составляет 200–300 рублей.

Где сдать биоматериал на анализ на краснуху

Анализы на краснуху делают как в государственных, так и в коммерческих диагностических лабораториях. Многие предпочитают второй вариант — занятым горожанам проще заплатить невысокую цену, но сдать анализ в удобно расположенном отделении лаборатории, в комфортное для них время, избежав очередей и прочих «прелестей» бесплатной медицины.

В столице работают сотни лабораторий, но как выбрать надежную?

Доверия заслуживают крупные сетевые лаборатории, у которых есть средства на покупку дорогостоящего современного оборудования. В наши дни проведение анализов — высокотехнологичный процесс, и от качества техники и материалов зависит многое. Не менее важен и контроль качества. Многие анализы, в частности ПЦР, требуют неукоснительного соблюдения технологии забора и исследования биоматериала, малейшая ошибка может сказаться на результатах. Поэтому, выбирая лабораторию, поинтересуйтесь, как там контролируют качество работы.

Сочетание разных диагностических методов позволяет определить наличие инфекции и иммунитета к ней практически со стопроцентной достоверностью. Помните о том, что краснуха лечится, а вакцинация против этой болезни переносится легко. А вот само заболевание во взрослом возрасте может иметь довольно тяжелое течение и последствия. Краснуха — типичный пример болезни, предупредить которую намного легче и дешевле, чем лечить.

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.08) на тему: Характеристика противокраснушного иммунитета и выявление врожденной краснухи в группах риска

Автореферат диссертации по медицине на тему Характеристика противокраснушного иммунитета и выявление врожденной краснухи в группах риска

На правах рукописи

Рогушина Наталья Леонидовна

ХАРАКТЕРИСТИКА ПРОТИВОКРАСНУШНОГО ИММУНИТЕТА И ВЫЯВЛЕНИЕ ВРОЖДЕННОЙ КРАСНУХИ В ГРУППАХ РИСКА

14.01.08 — педиатрия 14.01.09 — инфекционные болезни

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Работа выполнена на кафедре инфекционных болезней с курсом детских инфекций в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Северный государственный медицинский университет» (г. Архангельск) Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации

доктор медицинских наук, доцент Самодова Ольга Викторовна

доктор медицинских наук, профессор Сибилева Елена Николаевна

доктор медицинских наук, профессор Скрипченко Наталья Викторовна

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Санкт-Петербургская

государственная педиатрическая медицинская академия» (г. Санкт-Петербург) Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации

Защита диссертации состоится « /У» и^^се 2010 г. в часов на заседании Совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 208.004.02 при ГОУ ВПО «Северный государственный медицинский университет» (г. Архангельск) Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию по адресу: 163061, г. Архангельск, пр. Троицкий, 51.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУ ВПО «Северный государственный медицинский университет» (г. Архангельск) Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (163061, г. Архангельск, пр. Троицкий, 51).

Автореферат разослан « мая 2010 г.

Ученый секретарь Совета по защите докторских и кандидатских диссертаций, доктор медицинских наук, профессор

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Актуальность проблемы краснушной инфекции определяется ее повсеместным распространением, высоким удельным весом неманифестных форм инфекции и вовлечением в эпидемический процесс взрослого населения (Оберт А.С. и др., 2009; Помогаева А.П. и др., 2009; Рамазанова К.Х. и др., 2009; Асоян А.В. и др., 2010; Ai Theng Ch. et al., 2008; Seneze C. et al., 2008). Краснуха во время беременности может привести к мертворожденно, самопроизвольным выкидышам, а также возникновению синдрома врожденной краснухи плода, для которого характерно формирование пороков развития и инвалидизация в последующем (Бадаев Н.В. и др., 2009; Мамаева Т.А и др., 2009; Тимченко В.Н. и др., 2009; Фельдблюм И.В. и др., 2009; Duszak R.S., 2009). Все вышеперечисленное подтверждает целесообразность научных исследований и необходимость надзора за этой инфекцией (Тюников Г.И. и др., 2007; Лялина JI.B. и др., 2009; Малкова Е.М. и др., 2009; Михеева И.В. и др., 2010; Самойлович Е.О. и др., 2010; Carnicer-Pont D. et al., 2008; Doshi S. et al., 2009).

Всемирная организация здравоохранения к 2010 году определила одной из задач снижение уровня заболеваемости врожденной краснухой до показателя менее одного случая на 100 000 живорожденных и заболеваемости приобретенной краснухой менее 1 на 1 000 000 населения (ВОЗ, 2005). Для достижения этого удельный вес восприимчивых к краснухе женщин детородного возраста не должен превышать 7 % (Бурашникова И.П., 2004). Снижение числа восприимчивых к краснухе возможно путем проведения вакцинопрофилактики (Бектимиров Т.А., 2006; Феклисова J1.B. и др., 2007; Юминова Н.В., 2008; Yalcin A. et al., 2008). Важным аспектом эпидемиологического надзора за краснухой является объективная оценка эффективности вакцинации, которая возможна только при проведении серомониторинга. Серологическое обследование дает наиболее точную информацию о состоянии противокраснушного иммунитета в популяции (Фельдблюм И.В. и др., 2007; Репина И.Б. и др., 2008; Михеева И.В. и др., 2010). Проблема формирования поствакцинального и постинфекционного иммунитета к краснухе сохраняет свою актуальность до настоящего времени (Семериков В.В. и др., 2006; Феклисова JI.B. и др., 2007; Репина И.Б. и др., 2008;). До сих пор остается нерешенным вопрос о повторной иммунизации против краснухи при низких значениях специфических антител к этой инфекции (Феклисова Л.В. и др., 2007; Terada К. et al., 2009). Установлено, что лица с минимальным уровнем защиты имеют высокий риск повторной инфекции, частота которой может составлять 14,0-18,0 % (Кицак В.Я., 2004).

Другие публикации:  Через сколько вылечивается хламидиоз

Высокая медицинская и социальная значимость краснухи, сложность предупреждения заражения беременных женщин, наличие инапарантных форм

заболевания, при которых сохраняется риск инфицирования плода, отсутствие сведений о распространенности синдрома врожденной краснухи (Фельдблюм И.В. и др., 2009; Мусабаев Э.И., 2010; Bloom S. et al., 2005; Ang L.W. et al., 2010) — все это определило направление нашего научного поиска.

Цель исследования: оптимизация профилактики врожденной краснухи на основе изучения специфического противокраснушного иммунитета и распространенности инфицирования вирусом краснухи плодов и новорожденных группы риска.

1. Провести эпидемиологический анализ заболеваемости краснухой в Архангельской области за период 1979-2009 гг.

2. Определить наличие маркеров краснухи у новорожденных группы риска.

3. Оценить бремя внутриутробного инфицирования вирусом краснухи в группе умерших новорожденных и плодов.

4. Дать характеристику специфического противокраснушного иммунитета.

Получены новые знания по течению эпидемического процесса краснуш-ной инфекции на территории Архангельской области в довакцинальном и в течение десяти лет вакцинального периода. Получены новые данные по изменению возрастного состава заболевших краснухой в довакцинальном и вакцинальном периодах.

Впервые установлено наличие врожденной краснухи в группе риска. Показано, что инфицирование вирусом краснухи чаще регистрируется у погибших плодов и новорожденных в сочетании с другими перинатальными патогенами.

Получены новые знания о структуре противокраснушного иммунитета у обследованных в возрастном аспекте. Показано, что в структуре восприимчивых к вирусу краснухи доля девушек-подростков была ниже, чем обследованных старших возрастных групп. Представлена сравнительная характеристика гуморального иммунитета к краснушной инфекции в нашем регионе в группе вакцинированных и невакцинированных. Получены новые данные по распространенности атипичных форм эндемичной краснухи.

На основании результатов проведенного исследования установлено, что для лабораторного подтверждения врожденной краснухи целесообразно одновременное обследование диады мать-дитя на наличие серологических маркеров инфекции в виде специфических иммуноглобулинов и определения авидности антител методом иммуноферментного анализа.

Для оптимизации диагностики врожденной краснухи показана необходимость обследования погибших плодов и новорожденных не только при наличии у них врожденных пороков развития, характерных для синдрома врожденной краснухи, но и при неспецифических проявлениях в виде синдрома асфиксии, пневмонии, гепатита.

На основании проведенного серологического обследования методом им-муноферментного анализа был установлен удельный вес серонегативных и лиц с низким титром специфических противокраснушных антител в разных возрастных группах, нуждающихся в проведении вакцинации. Получены данные о наличии неиммунной прослойки в группе вакцинированных, требующих бустер-иммунизации.

Положения, выносимые на защиту:

1. Массовая иммунизация населения против краснухи способствовала изменению параметров эпидемического процесса в сравнении с довак-цинальным периодом и оказала значительное влияние на формирование специфического иммунитета.

2. Целесообразность оценки противокраснушного иммунитета определяется необходимостью мониторинга инфекции и профилактики синдрома врожденной краснухи.

3. Маркеры вируса краснухи определяются у погибших плодов и новорожденных чаще в сочетании с другими вирусными патогенами.

4. Структура иммунологической прослойки характеризуется наличием серопозитивных и восприимчивых к краснухе лиц, нуждающихся в вакцинации.

Апробация работы и внедрение результатов исследования в практику.

Материалы диссертации доложены на научной конференции молодых ученых с международным участием СГМУ (Архангельск, 2007); Всероссийской научно-практической конференции с международным участием (Архангельск,

2007); итоговой научной сессии СГМУ и СНЦ СЗО РАМН (Архангельск,

2008); 3-й научно-практической конференции с международным участием (Архангельск, 2008); Всероссийской научно-практической конференции (Санкт-Петербург, 2008); I Всероссийском конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2009); городской врачебной конференции (Архангельск, 2009); XXXVIII Ломоносовских чтениях СГМУ (Архангельск, 2009); региональной научно-практической конференции (Архангельск, 2009).

По материалам диссертации опубликовано 14 печатных работ, из них 2 в изданиях, рекомендуемых ВАК.

Материалы исследования используются в работе лечебно-профилактических учреждений г. Архангельска, в учебно-педагогическом процессе кафедры инфекционных болезней с курсом детских инфекций Северного

государственного медицинского университета (акт внедрения от 29 июня 2009 года). Материалы работы внедрены в клиническую практику ГУЗ «Областная детская клиническая больница» (акт внедрения от 29 июня 2009 года). Работа выполнена по плану НИР Северного государственного медицинского университета «Здоровье населения Европейского Севера» (номер государственной регистрации 01200853093).

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 145 страницах машинописного текста, иллюстрирована 14 таблицами, 38 рисунками, двумя клиническими примерами.

Работа включает введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, четыре главы результатов собственных исследований, заключение, выводы, практические рекомендации. Библиографический указатель содержит 220 источников, в том числе 129 отечественных и 91 зарубежный.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проводили в период с 2006 по 2009 год в ГОУ ВПО «Северный государственный медицинский университет» г. Архангельск. Дизайн исследования включал: I — анализ эпидемиологических данных и заболеваемости краснухой на территории Архангельской области за период 1979-2009 годы, II — обследование новорожденных группы риска по синдрому врожденной краснухи и их матерей на наличие лабораторных маркеров краснухи, III — исследование аутопсийного материала плодов и новорожденных с перинатальной патологией, погибших в антенатальном, интранатальном и неонатальном периодах, IV — изучение специфического иммунитета к вирусу краснухи.

Для оценки многолетней динамики заболеваемости краснухой проведен ретроспективный эпидемиологический анализ многолетних наблюдений за эпидемическим процессом краснухи с 1979 по 2009 г. и динамикой регистрации синдрома врожденной краснухи в Архангельской области за период с 1991 по 2009 г. Для анализа заболеваемости краснухой в Архангельской области были использованы государственные статистические отчетные формы № 2 «Сведения об инфекционных и паразитарных заболеваниях» за период с 1979 по 2009 г. Отчетные формы № 5 «Сведения о профилактических прививках» и № 6 «Сведения о контингентах детей, подростков и взрослых, привитых против инфекционных заболеваний» за период с 2000 по 2009 г. Данные о заболеваемости населения краснухой на территории Российской Федерации получены из опубликованных информационных сборников статистических и аналитических материалов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

Поиск врожденной краснухи в группе риска был проведен у 174 (147 в ИФА, 27 в ПЦР) новорожденных детей. Критерии включения: наличие одного или нескольких признаков, угрожаемых в отношении врожденной краснухи: дефект слуха, врожденное заболевание сердца, поражение глаз (врожденная глаукома, пигментная ретинопатия, катаракта), пурпура, спленомегалия, микроцефалия, менингоэнцефалит, отставание в развитии, возникновение желтухи в течение 24 часов после рождения (ВОЗ, 2003), а также множественные пороки развития. В специализированных отделениях второго этапа выхаживания ГУЗ «Архангельская областная детская клиническая больница» были обследованы 147 новорожденных и параллельно с ними 100 матерей на наличие специфических иммуноглобулинов класса G и М. В динамике были изучены специфические IgM и IgG у 25 детей. Авид-ность специфических IgG определяли у 26 новорожденных и 19 матерей. Для изучения специфического иммунитета использовали определение антител класса М, G и авидности IgG к вирусу краснухи методом иммунофермент-ного анализа (ИФА) с применением тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» Россия (Федеральная лицензия № 99-04-000086). Для выявления специфических IgG к вирусу краснухи использовали тест-ситему D-2552 «ВектоРубелла- IgG-стрип» (ФСП 42-0117-4696). По инструкции, прилагаемой к тест-системе, титр антител IgG к краснухе, превышающий 10 ME/мл, принимали за защитный. Противокраснушные IgM изучали с использованием тест-системы D-2554 «ВектоРубелла- IgM-стрип» (ФСП 42-0117-4694-03), авидность IgG определяли при применении иммуноферментной тест-системы: D-2556 «ВектоРубелла- IgG-авидность» (ФСП 42-0117-4695-03). Индекс авидности IgG в соответствии с инструкцией, прилагаемой к тест-системе, более 70 % расценивали как высокоавидный, от 50 до 70 % — среднеавидный, менее 50 % — низкоавидный. Исследования сывороток крови на наличие антител к вирусу краснухи проведены в иммунологической лаборатории областной детской клинической больницы.

Обследование 27 новорожденных с перинатальной патологией проведено методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) на базе вирусологической лаборатории Федерального государственного учреждения здравоохранения «Центр гигиены и эпидемиологии в Архангельской области».

С помощью сертифицированной тест-системы «АмплиСенс Rubella virus-FL» выявляли РНК вируса краснухи в клиническом материале методом ПЦР с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле, производитель — Федеральное государственное учреждение науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора, Россия, Москва (№ ФСР 2009/05501).

Был проведен ретроспективный анализ результатов гистологических, морфологических, лабораторных исследований у погибших плодов и новорожденных, выполненных на базе централизованного паталогоа-натомического отделения ГУЗ «Архангельская областная клиническая больница» за пять лет (2004-2008 гг.). Для оптимизации расшифровки этиологии внутриутробных патогенов в 2007 г. у 67 погибших детей были обследованы аутопсийные материалы: мазки-отпечатки сердца, почек, головного мозга одномоментно на четыре вируса: краснухи, цитомегало-вируса (ЦМВ), герпеса человека 6 типа (ВПГ-6), Эпштейна-Барр (ВЭБ) в реакции непрямой иммунофлуоресценции. Реакция непрямой иммуноф-луоресценции проводилась при использовании тест-систем, содержащих высокочувствительные пулы к вирусам. Исследование выполнено в лаборатории эпидемиологии оппортунистических инфекций НИИЭМ им Н.Ф. Гамалеи г. Москва. В 2009 г. у 19 погибших плодов аутопсийные материалы были исследованы на наличие вируса краснухи, ЦМВ, ВГЧ-6, ВПГ-1,2, ВЭБ, тохсоплазмы с помощью сертифицированных тест-систем АмплиСенс производства Федерального государственного учреждения науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора, Россия, Москва. Пробы органов от двух до пяти от каждого погибшего ребенка исследовали методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Критерии включения в группу: перинатально погибшие плоды во втором и третьем триместре беременности, мертворожденные с врожденными пороками развития, абортивный материал после прерывания беременности в связи с контактом по краснухе или течением краснухи у женщины во время беременности, новорожденные с клиникой внутриутробной инфекции и/или врожденными пороками развития, умершие в неонатальном периоде. Критерии исключения: прерывание беременности по показаниям со стороны матери.

Для характеристики противокраснушного иммунитета у 623 человек определяли противокраснушные и у 101 человека авидность методом ИФА. Для оценки и сравнения напряженности специфического иммунитета всех обследованных разделили на две группы: первая — вакцинированные (90 человек), вторая — невакцинированные (533 человек). Критерии включения в группу: женский пол, отсутствие на момент обследования острого заболевания или обострения хронической патологии. Критерии исключения: отказ от участия в исследовании.

Дизайн исследования — поперечное.

Общее количество проведенных исследований биологического материала составило 2452, количество обследованных пациентов 983 (табл. 1).

Лабораторные методы, количество проведенных исследований и обследованных лиц

Методы исследования обследованных проведенных